ICS 67.050 x 04 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 21309—2007 涂渍油脂或石蜡大米检验 Test of oil and liquid paraffin spread on rice 2007-11-23发布 2008-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 21309—2007 前言 本标准由国家粮食局提出。 本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：河南工业大学、陕西省粮油产品质量监督检验所。 本标准主要起草人：范璐、毕艳兰、霍权恭、周展明、张雪梅、任正东、吴存荣、唐怀健。 GB/T21309—2007 涂渍油脂或石蜡大米检验 1范围 判定。C 本标准适用于大米中油脂或石蜡的检验 油斑检验方法中油脂或石蜡检出限为0.08%，石蜡检验方法石蜡检出限为0.02%。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB5491粮食、油料检验扦样、分样法 3原理 3.1油斑检验原理 在55℃下，涂渍在大米上的油脂或石蜡，随着大米内部水蒸气的蒸发部分渗出，被包裹的纸纤维所 吸附，在纸面形成油斑。油斑的出现可用于判断大米是否涂渍油脂或石蜡 3.2气相色谱法原理 涂渍石蜡的大米经石油醚提取、甲酯化处理后，在规定的气相色谱条件下，石蜡和脂肪酸甲酯分离， 在气相色谱图上，石蜡呈现拖尾较长的色谱峰，脂肪酸甲酯峰叠加其上，而天然油脂的脂肪酸甲酯色谱 图无此现象，据此判断大米中是否涂渍石蜡。 3.3微柱层析法原理 石蜡和从大米中提取的油脂及其相关组分与流动相和硅胶之间分配系数存在差异，经反复分配，由 于石蜡极性低，保留时间最短，先流出微柱，其他成分后流出微柱，石蜡与其他组分分离。色谱图中的石 蜡峰可判定大米是否涂渍石蜡。 4材料与试剂 除非另有说明，本标准所使用的试剂为分析纯，水为蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 4.1新闻纸：定量48.8g/m。 4.2滤纸。 4.3 石油醚：沸程30℃~60℃。 4.4甲醇。 4.5 5正已烷（色谱纯）。 4.6 无水乙醇。 4.7苯。 4.8 乙醚。 4.9甲酸。 4. 10 氢氧化钾。 4.11无水硫酸钠。 1 GB/T21309—2007 4.12氢氧化钾-甲醇溶液（0.4mol/L）：称取2.7g氢氧化钾于100mL甲醇中溶解，静置，上清液 备用。 5仪器 5.1比色管：25mL。 5.2具塞试管：2mL。 5.3量筒：5mL、10mL 5.4玻璃板：20cm×20cm×3mm，洗净，干燥备用。 5.5恒温干燥箱。 5.6索氏抽提器：120mL、500mL（250mL抽提瓶）。 5.7 恒温水浴锅 5.8气相色谱仪：脂肪酸甲酯毛细管分析柱，30m×0.32mm×0.5μum；氢火焰离子化检测器。 5.9 微柱薄板分析仪"，附有Chromarod-SⅢ硅胶色谱棒。 6操作步骤 6.1样品制备 按GB5491执行。 6.2油斑检验 取三张15cm×20cm新闻纸（4.1），将纸纵向两边向内折1cm。称取三份大米样品，每份30g，分 别均匀平铺于三张新闻纸上。从纸的横向一端用力卷包大米样品，直至将大米样品均匀卷包在纸内。 然后将三个样品纸包置于玻璃板上，再用一块玻璃板压在样品纸包上面，用手掌向下挤压的同时在水平 面上左右旋转玻璃板，压紧样品纸包，将压紧的三个样品纸包置于恒温干燥箱中，上面再另加三块玻璃 板压住。恒温干燥箱温度设置为55℃，由室温开始加热60min，取出样品纸包，倒出大米样品，观察新 闻纸面上是否有油斑。 6.3石蜡检验 6.3.1气相色谱法 取20g大米样品，用滤纸（4.2）包裹，置于120mL索氏抽提器（5.6）中，加石油醚（4.3）回流提取 1h，回收溶剂，挥干溶剂。用5mL正已烷（4.5）溶解石油醚提取物并转移至25mL比色管（5.1）中，加 4mL0.4mol/L氢氧化钾-甲醇溶液（4.12），振荡，静置10min，加水10mL，静置至上层溶液透明后， 移取提取液1.5mL于具塞试管（5.2）中，加适量无水硫酸钠（4.11）脱水，放置10min，备用。 温度300℃。取上述提取液1μL，进样分析。 6.3.2微柱层析法 用石油醚（4.3)以100滴/min的滴落速度提取1h。取出样包，得到约0.1g～0.2g的提取物，挥干溶 剂后，提取物备用。 微柱分析仪参考条件：将上述得到的大米提取物，用正已烷稀释至提取物浓度为20mg/mL～ 30mg/mL.取1uL此溶液滴在微柱上，将微柱放在展开槽中，展开剂为正已烧十乙醚十甲酸=50十 20十0.3，进行第一次展开。展开高度为8cm时，将展开剂更换为正已烷十苯=1十1，再进行第二次展 1）IATROSCANMK-6S微柱薄板分析仪和Chromarod-SⅢI硅胶色谱棒均是由日本三菱集团雅特隆公司提供的产 品的商品名。给出此信息是为了方使本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效 果，则可使用这些等效的产品。 2 GB/T21309—2007 开。当展开高度为10cm时取出，挥干溶剂，置于微柱分析仪检测。空气流量1.5L/min；氢气流速 90mL/min；扫描速度：30s。 7结果分析与判定 出现油斑，则结果判定为阴性。若3个试样中有2个试样或全部出现油斑，即判定样品中涂渍了油脂或 石蜡。对涂渍石蜡的判定还需按6.3进行确认。 7.2观察6.3.1得到的色谱图，如果色谱图基线平稳，石蜡检验结果为阴性。如果紧跟在溶剂峰后有 -拖尾较长色谱峰，脂肪酸甲酯峰叠加其上，参见图1，石蜡检验结果为阳性。 7.3观察6.3.2得到的微柱层析色谱图，参见图2，在保留时间0.05min0.08min有色谱峰的，石蜡 检验结果为阳性。 pA - 5 10 15 20 25 nmin 图1涂渍石蜡大米油脂甲酯化后气相色谱图 16 rV14 H二酯 12 . FOT 8 6: + 蜡 2 ↓ 0.00 0. 05 0. 10 0. 15 0. 20 0.25 0. 30 0. 35 0. 10 0. 15 min 图 2 微柱层析色谱图