ICS 87.040 G 50 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T21866—2008 抗菌涂料（漆膜）抗菌性测定法和抗菌效果 Test method and effect for antibacterial capability of paints film 2008-05-14发布 2008-10-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 21866—2008 前言 本标准由中国石油和化学工业协会提出。 本标准由全国涂料和颜料标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国建筑材料科学研究总院、中化建常州涂料化工研究院、广东省微生物分析检 测中心、深圳市立新纳米应用技术有限公司、奥麒化工（中国）有限公司、上海富臣化工有限公司、深圳市 展辰达化工有限公司、北京展辰化工有限公司、华夏贝能（北京）生态科技有限公司、广东巴德士化工有 限公司、深圳方浩实业有限公司。 本标准主要起草人：王静、冀志江、赵玲、陈仪本、曹文、刘伟、叶荣森、朱胜美、严修才、陈延东、 王继梅、丁楠。 1 GB/T21866—2008 抗菌涂料（漆膜）抗菌性测定法和抗菌效果 1范围 本标准规定了建筑和木器用抗菌涂料（漆膜）抗细菌性能的测定方法及抗细菌效果 其他涂料（漆膜）抗细菌性能的测定也可参照使用。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T1250极限数值的表示方法和判定方法 GB/T 1727 漆膜一般制备法 GB/T 3186 色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样（GB/T3186—2006，ISO15528：2000IDT） GB/T 4789.2 食品卫生微生物学检验菌落总数测定 GB/T 9278 涂料试样状态调节和试验的温湿度（GB/T9278—2008,ISO3270:1984,IDT） SAGB19258 紫外线杀菌灯 GB19489 实验室生物安全通用要求 3术语和定义 3. 1 抑菌 bacteriostasis 抑制细菌、真菌、霉菌等微生物生长繁殖的作用。 3. 2 杀菌 sterilization 杀死细菌、真菌、霉菌等微生物营养体和繁殖体的作用。 3. 3 抗菌 antibacterial 抑菌和杀菌作用的总称。 3. 4 抗菌涂料 antibacterial coating 具有抗菌作用的涂料。 4方法简述 本方法通过定量接种细菌于待检验样板上，用贴膜的方法使细菌均匀接触样板，经过一定时间的培 养后，检测样板中的活菌数，并计算出样板的抗细菌率。 5试验条件 5.1实验室要求 1 GB/T21866—2008 5.2主要设备 5.2.1恒温培养箱（37士1)℃、冷藏箱（0～5）℃、超净工作台、压力蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、天平（精度 0.01 g)。 5.2.2灭菌平皿、灭菌试管、灭菌移液管、接种环、酒精灯。 5.3主要材料 5.3.1覆盖膜 泡10min，再用洗脱液冲洗，自然干燥。 5.3.2培养基 5.3.2.1营养肉汤培养基（NB) 牛肉膏 5.0 g 蛋白陈 10.0 g 氯化钠 5.0 g 制法：取上述市售材料按比例依次加人1000mL蒸馏水中，加热溶解后，用0.1mol/LNaOH溶 液（分析纯）调节pH值为7.0~7.2，分装后置压力蒸汽灭菌器内，121℃灭菌30min。 5.3.2.2营养琼脂培养基（NA) 1000mL营养肉汤（NB）中加人15g琼脂，加热熔化，用0.1mol/LNaOH溶液调节pH值为 7.0~7.2.分装后置压力蒸汽灭菌器内，121℃灭菌30min。 5.3.3试剂 5.3.3.1消毒剂 70%乙醇溶液。 5.3.3.2洗脱液 含0.85%NaCl的生理盐水。为便于洗脱可加人0.2%无菌表面活性剂（如吐温80）。用0.1mol/L NaOH溶液或0.1mol/LHCl溶液调节pH值为7.0~7.2，分装后置压力蒸汽灭菌器内，121℃灭菌 30 min。 5.3.3.3培养液 营养肉汤（NB)/生理盐水溶液。建议用于大肠杆菌的培养液浓度为1/500，金黄色葡萄球菌的培 养液浓度为1/100。为便于细菌分散可加入0.2%无菌表面活性剂（如吐温80）。用0.1mol/LNaOH 溶液或0.1mol/LHCl溶液调节pH值为7.0~7.2.分装后置压力蒸汽灭菌器内，121℃灭菌30min。 5.3.4检验菌种 a）金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）ASl.89 b）大肠埃希氏菌（Escherichiacoli)AS1.90 根据产品的使用要求，可增加选用其他菌种作为检验菌种。 注：实验用菌种应来源于国家级菌种保藏管理中心。 5.4样板 5.4.1阴性对照样板 编号A，是未放任何试板的直径为90mm或100mm的灭菌培养平皿中50mmX50mm面积大小 的空板。 5.4.2空白对照样板 编号B，是未添加抗菌成分的涂料试板，此对照涂料样品要求不含有任何无机或有机抗菌剂、防霉 剂、防腐剂。 注：空白对照样板可在中国建筑材料科学研究总院得到。 5.4.3抗菌涂料试验样板 编号C，是添加抗菌成分的涂料试板， 2 GB/T21866—2008 5.4.4涂料试板制备 按GB/T3186的规定进行取样。制备试板所用底材通常应是实际使用底材（例如水泥板、木板、金 属板、塑料板、贴膜纸板）。按照GB/T1727要求制作涂膜，涂料的施涂一般为两次涂刷，第一遍表干后 涂刷第二遍，涂膜总厚度湿膜小于100um，样板应平整、无锈、无油污等。若以木板作为试板底材，则要 求漆膜封住整个木板。试板涂刷后按照GB/T9278规定的条件干燥7d，保证试板涂膜完全干后再用 于实验。 将涂刷好的试板裁成50mmX50mm大小的试板10片，在试验前应进行消毒，建议用超净工作台 中紫外灭菌灯消毒处理试板5min，备用。 6检验程序 6.1菌种保藏 将菌种接种于营养琼脂培养基（NA）斜面上，在（37土1）℃下培养24h后，在（0～5）℃下保藏（不得 超过1个月），作为斜面保藏菌种。 6.2菌种活化 使用保藏时间不超过2周的菌种，将斜面保藏菌种转接到平板营养琼脂培养基上，在（37土1）℃下 培养（18～20)h，试验时应采用连续转接2次后的新鲜细菌培养物（24h内转接的）。 6.3菌悬液制备 用接种环从6.2培养基上取少量（刮1～2环）新鲜细菌，加人培养液中，并依次做10倍递增稀释 液，选择浓度为（5.010.0）X10°cfu/mL的菌液作为接种菌液，按GB/T4789.2的方法操作。 6.4样品试验 分别取0.4mL～0.5mL试验用菌液（6.3)滴加在阴性对照样板（A）,空白对照样板（B)和抗菌涂 料样板(C)上。 用灭菌镊子夹起灭菌覆盖膜分别覆盖在样（A）、样（B)和样（C）上，一定要铺平且无气泡，使菌均匀 接触样品，置于灭菌平血中，在（37王1）℃、相对湿度RH>90%条件下培养24h。每个样品做3个平行 试验。 取出培养24h的样品，分别加入20mL洗液，反复洗样（A）、样（B）、样（C）及覆盖膜（最好用镊子夹 起薄膜冲洗），充分摇匀后，取洗液接种于营养琼脂培养基（NA）中，在（37士1）℃下培养（24～48）h后活 菌计数，按GB/T4789.2的方法测定洗液中的活菌数。 7检验结果计算 将以上测定的活菌数结果乘以1000为样品A、样品B、样品C培养24h后的实际回收活菌数值， 数值分别为A、B、C，保证试验结果要满足以下要求，否则试验无效： 样品A的实际回收活菌数值A应均不小于1.0X10’cfu/片，且样品B的实际回收活菌数值B应均 不小于1.0×10*cfu/片； 同一空白对照样品B的3个平行活菌数值要符合（最高对数值一最低对数值）/平均活菌数值对数 值小于或等于0.3。 抗细菌率计算公式为： R=(B-C)/BX100 式中： R——抗细菌率，以（%）表示，数值取四位有效数字，按照GB/T1250中规定进行； B一空白对照样板24h后平均回收菌数（cfu/片）； C一抗菌涂料样板24h后平均回收菌数（cfu/片）。