ICS 71.100.70 CCS Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T 42424—2023 染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种 准用染发剂的测定 液相色谱质谱法 Determination of 11 kinds of restricted dyestuff such as 5-amino-6-chloro-o-cresol in hair dyesHPLC-MS 2023-10-01实施 2023-03-17发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T42424—2023 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本文件起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、上海香料研究所有限公司、浙江颜雪化妆品有 限公司、谱尼测试集团股份有限公司、悠宜生物科技（江苏）有限公司。 本文件主要起草人：顾宇翔、聂磊、杨斌、郑翌、何光明、富玉、由冰、翁史昱、成姗 1 GB/T42424—2023 染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种 准用染发剂的测定液相色谱质谱法 警示一一使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件 1范围 本文件描述了染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种准用染发剂的液相色谱质谱测定方法，包括 原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、试验数据处理、回收率、精密度等内容。 本文件适用于染发产品中1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-4-羟 乙氨基茴香醚、2,6-二羟乙基氨甲苯、羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺盐酸盐、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、4-羟 硝基苯酚的测定。 本文件中1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐、3-硝基对羟乙氨基酚的方法检出限为3mg/kg，定量限 为10mg/kg；羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、4-羟丙氨基- 3-硝基苯酚的方法检出限为0.5mg/kg，定量限为2mg/kg;2,6-二羟乙基氨甲苯、羟乙基-3，4-亚甲二氧 基苯胺盐酸盐、羟乙基-2-硝基对甲苯胺的方法检出限为0.15mg/kg，定量限为0.5mg/kg；5-氨基-6-氯- 邻甲酚、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚的方法检出限为10mg/kg，定量限为40mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经甲醇超声提取、离心后用10%甲醇稀释，0.22um的滤膜过滤，滤液注入液相色谱质谱仪检 测，基质空白标准曲线外标法定量。 试剂和材料 5 除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。 5.1水,GB/T6682，一级。 5.2甲醇。 1 GB/T42424—2023 5.3甲酸。 5.4乙酸铵，质谱纯。 5.511种染料的标准品：纯度大于95%，INCI名称（国际化妆品原料名称）、CAS号、分子式、相对分子 质量和化学结构式见附录A中表A.1。 5.750%（体积分数）甲醇溶液：取50mL甲醇加50mL水，混合均匀。 5.811种染发剂的标准储备液：分别准确称取标准品（5.5）20mg，精确至0.1mg，于100mL的棕色容 量瓶中，用50%甲醇溶液（5.7）溶解并定容至刻度，即得质量浓度为200mg/L的标准储备液。4℃冰箱 冷藏可保存24h，宜现配现用，每次取用前需超声助溶5min。 5.9 滤膜：孔径0.22μm，材质为聚四氟乙烯（PTFE)。 6 仪器设备 6.1液相色谱质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 6.2分析天平：感量为0.1mg和1mg。 6.3涡旋振荡器。 6.4具塞离心刻度试管：25mL或50mL。 6.5超声振荡器：功率不小于500W，频率53kHz。 6.67 离心机：转速≥10000r/min。 试验步骤 7.1 1样品处理 称取约0.5g样品，精确至0.001g，于具塞离心刻度试管中，涡旋振荡1min，加入8mL甲醇（5.2）， 冰浴超声提取20min，用水定容至10mL，10000r/min离心5min。取上清液2.0mL于10mL棕色 容量瓶中，用10%甲醇溶液（5.6）定容，0.22um滤膜过滤，从制备到检测控制在6h内完成。 平行做两份试验。 7.2 测定参考条件 液相色谱测定参考条件如下： a) 色谱柱规格：Ci：色谱柱，100mm×2.1mm（粒径1.9μm），或性能相当者； b) 柱温：30℃； c) 流动相流速：0.25mL/min； (P 进样量：2μL； e) 流动相及梯度洗脱条件见表1。 表1液相色谱流动相及梯度洗脱条件 时间 5mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸） 由 min % % 0.00 06 10 1,50 06 10 2 GB/T42424—2023 表1 液相色谱流动相及梯度洗脱条件（续） 时间 5mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸） 飄由 min % % 4.00 40 60 7.00 10 90 8.00 10 90 8.10 06 10 12.00 06 10 7.2.2 质谱测定参考条件如下： a) 电离方式：电喷雾电离，正离子模式，仅2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚采用负离子模式； b) 离子源接口电压：4.0kV（正离子模式），一3.0kV（负离子模式）； c) 雾化气：氮气3.0L/min； d) 干燥气：氮气10.0L/min； e) 碰撞气：氩气； f) 接口温度：300℃； g) 脱溶剂管温度：250℃； h) 加热模块温度：400℃； 驻留时间：23ms； i) j) 延迟时间：3ms； k) 扫描模式：多反应监测（MRM），定量、定性离子，预杆偏差电压和碰撞能量见表2。 表 2 质谱参数 母离子 定量、定性离子 Q1预杆偏差电压 碰撞能量 Q3预杆偏差电压 化合物 m/z m/2 V V V 99.10* 17 16 18 1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐 143.10 126.1 -10 17 22 135.00* -11 -18 25 羟乙基对苯二胺硫酸盐 153.10 118.00 -18 -25 21 123.00* 21 25 23 183.10 2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚 95.00 -21 43 17 135.10* -11 27 24 2,6-二羟乙基氨甲苯 211.10 107.00 -11 39 20 137.00* -13 18 26 羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺 182.1 盐酸盐 106 -10 19 20 122.00* -13 31 20 2-甲基-5-羟乙氨基苯酚 168.10 77.00 21 48 26 3 GB/T42424—2023 表2 质谱参数 (续） 母离子 定量、定性离子 Q1预杆偏差电压 碰撞能量 Q3预杆偏差电压 化合物 m/z m/z V V V 123.10* -11 -14 23 4-羟丙氨基-3-硝基苯酚 213.10 148.10 11 17 27 121.10* -11 16 22 羟乙基-2-硝基对甲苯胺 197.10 -15 94.00 22 18 123.10* 12 20 22 5-氨基-6-氯-邻甲酚 158.00 104.10 -11 23 21 151.10* -11 13 28 3-硝基对羟乙氨基酚 199.1 -11 123.1 -13 23 120.00* 12 19 18 2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚 187.00 157.00 12 13 27 表示定量离子。 7.3 标准工作溶液的配制 混合标准溶液：分别按表3取不同量的标准储备液（5.8）于50mL的棕色容量瓶中，用水定容，每次 取用前需超声助溶5min，现配现用。 表3 混合标准溶液和基质空白标准工作溶液的浓度 配制混合标准溶液时 混合标准溶液 基质空白标准工作溶液 化合物 的移取量 的质量浓度 的质量浓度梯度 mL mg/L mg/L 1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐 2.5 10 0.1、1、2、3、4、5 羟乙基对苯二胺硫酸盐 0.5 2 0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1 2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚 0.5 2 0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1 2,6-二羟乙基氨甲苯 0.125 0.5 0.005.0.05、0.1、0.15、0.2、0.25 羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺盐酸盐 0.125 0.5 0.005、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25 2-甲基-5-羟乙氨基苯酚 0.5 2 0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1 4-羟丙氨基-3-硝基苯酚 0.5 2 0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1 羟乙基-2-硝基对甲苯胺 0.125 0.5 0.005、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25 5-氨基-6-氯-邻甲酚 10 40 0.4、4、8、12、16、20 3-硝基对羟乙氨基酚 2.5 10 0.1、1、2、3、4、5 2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚 10 40 0