(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110735467.0 (22)申请日 2021.06.30 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113332320 A (43)申请公布日 2021.09.0 3 (73)专利权人 北京中医药大学 地址 100029 北京市朝阳区北三环东路1 1 号 (72)发明人 张兰珍　亓旗　刘宇琦　 (74)专利代理 机构 北京悦成知识产权代理事务 所(普通合伙) 11527 专利代理师 高艳丽 (51)Int.Cl. A61K 36/185(2006.01) A61P 39/06(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61K 131/00(2006.01) (56)对比文件 李菁等.“大孔树脂分离纯化 鞣质的工艺研 究”. 《化学工程师》 .2017,(第1 1期),第15 -19页， 尤其是第15页摘要. 审查员 韩航 (54)发明名称 诃子鞣质部位的纯化方法及诃子鞣质部位 (57)摘要 本发明公开了一种诃子鞣质部位的纯化方 法及诃子鞣质部位， 该纯化方法包括如下步骤： 将含诃子提取物 的上样液上样于装有HPD400大 孔树脂的层析柱中， 并进行吸附； 吸附完成后， 用 去离子水洗脱， 洗脱流速为2.5～4.5BV/h； 然后 用60～80v ol％乙醇洗脱， 洗脱流速为5～7BV /h， 收集乙醇洗脱液并浓缩， 干燥， 得到诃子鞣质部 位纯化产物。 本发明所得诃子鞣质部位的总鞣质 的含量为60％以上， 总鞣质的转移率为60％以 上。 权利要求书1页 说明书10页 CN 113332320 B 2022.07.26 CN 113332320 B 1.一种诃子鞣质部位的纯化方法， 其特 征在于， 所述纯化方法包括如下步骤： 所用大孔树脂HPD400在上样前进行预处理， 所述预处理包括以下步骤： 将大孔树脂 HPD400装于层析柱中， 用95vol％乙醇浸泡4小时， 然后用4BV的95vol％的乙醇洗脱， 再用水 洗至无乙醇； 然后用5wt％盐酸溶液浸泡3h， 接着用3BV的5wt％盐酸溶液洗脱， 然后用水洗 脱至洗脱液为中性； 再用5wt％氢氧化钠溶液浸泡3h， 用3BV的5wt％氢氧化钠溶液洗脱， 然 后用水洗脱至洗脱 液为中性； 用95vol％乙醇洗脱至乙醇洗脱 液与水以1: 5的体积比混合后 无白色混浊； 最后用水洗脱至 洗脱液无乙醇； 含诃子提取物的上样液由包括以下的步骤制备而得： 将诃子药材粉碎至5～20目， 得到 诃子药材粉； 将诃子药材粉用50～70vol％的乙醇在40～60℃下提取三次， 合并三次提取 液， 过滤， 浓缩， 得诃子提取物； 其中， 每次提取时， 乙醇的用量为诃子药材粉重量的9～11 倍， 每次提取时间为8～11h； 将诃子提取物加水分散， 并过滤或离心得到清液， 即为含诃子 提取物的上样液； 将含诃子提取物的上样液上样于装有HPD400大孔树脂的层析柱中， 并进行吸附； 所述 层析柱的径高比为1:6～8； 所述上样液的浓度为0.15～0.25g生药/mL； 吸附完成后， 用1.5～2.2BV的去离子水洗脱， 洗脱流速为2.7～3.5BV/h； 然后用5～ 5.5BV的65～75vol％乙醇洗脱， 洗脱流速为5～7BV/h， 收集乙醇洗脱液并浓缩， 干燥， 得到 诃子鞣质部位纯化产物； 所得诃子鞣质部位纯化产物的总鞣质含量 为60％以上， 总鞣质的转移率 为60％以上。 2.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特征在于， 吸附完成后， 先用1.8～2.0BV的去离 子水洗脱， 洗脱流速为2.8～3.2BV/ h。 3.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特 征在于， 乙醇的洗脱流速为5.5～6.5BV/ h。 4.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特 征在于， 所述层析柱的径高比为1:7～8。 5.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特 征在于， 诃子药 材粉为5～10目。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113332320 B 2诃子鞣质部位的纯化方 法及诃子鞣质部位 技术领域 [0001]本发明涉及一种诃子鞣质部位的纯化方法及诃子鞣质部位。 背景技术 [0002]诃子是使君子科榄仁树属植物诃子及其变种绒毛诃子的干燥成熟果实， 在藏医蒙 医中应用十分广泛， 有 “藏药之王 ”之称。 在藏、 蒙药中用于祛风(气)、 火(胆)、 痰、 寒， 并能行 气活血， 镇静解毒。 诃子含有多酚类， 黄酮类、 多糖类、 萜类等多种化学成分， 其中含量最多 的是鞣质类， 以可水解鞣质为主。 鞣质具有较强的抗氧化能力， 可以抑制荷瘤小鼠的肿瘤生 长。 而鞣质中以没食子酸、 安石榴苷、 没食子酸甲酯、 五没食子酰葡萄糖、 柯里拉京、 鞣花酸 为指标性成分。 [0003]CN109966328A公开了一种诃子中鞣花酸和诃子酸的提取方法及其 组合物。 该提取 方法包括以下步骤： 预处理， 将诃子粉碎过筛； 将粉碎后的诃子回流提取， 然后通过微孔滤 膜， 得到固体A和提取液  A； 将固体A再进 行回流提取， 然后通过微孔滤膜， 得到固体B和提取 液B； 混合提取液A与提取液B， 浓缩， 通过大孔 吸附树脂， 溶剂洗脱， 结晶干燥得到诃子中鞣 花酸和诃子酸。 该专利文献主 要得到鞣 花酸和诃子酸。 [0004]CN108338996A公开了一种制备诃子中鞣质类有效成分的方法， 包括如下步骤： 将 诃子粉末用无水乙醇超声提取， 提取液减压浓缩成浸膏； 将浸膏用适量水溶解后用大孔吸 附树脂柱色谱分离， 依次用纯水、 体积分数20％、 40％、 60％、 80％、 90％、 95％的乙醇梯度洗 脱， 收集90％乙醇洗脱部位， 再经硅胶柱色谱分离， 依次用体积比65:1、 55:1、 45:1、 35:1、 25:1、 10:1的氯仿 ‑甲醇洗脱， 收集25:1洗脱部分， 浓 缩即得。 大孔吸附树脂柱为D101型。 [0005]CN109453212A公开了一种具有抗癌作用的毛诃子提取物及其鞣质部位制备方法。 该专利文献将制得的毛诃子提取物采用大孔树脂柱纯化时， 上样并完成吸附后， 采用0～ 15％含水有机溶剂洗脱1.5～  3BV， 流速为0.5～2mL/min， 再用60～80％含水有机溶剂洗脱 4～ 6BV， 洗脱流速为0.5～2mL/min， 收集洗脱液， 浓缩， 干燥。 该专利文献所得到的产物中 的总鞣质的含量 仍待提高。 发明内容 [0006]有鉴于此， 本发明的一个目的在于提供一种诃子鞣质部位的纯化方法， 该纯化方 法所得的诃子鞣质部位的纯化产物中总鞣质的含量和 转移率较高。 进一步地， 本发明的纯 化方法工艺稳定， 重现性 好。 [0007]本发明的另一目的在于提供一种诃子鞣质部位。 [0008]本发明的目的是通过如下技 术方案实现的。 [0009]本发明提供一种诃子鞣质部位的纯化方法， 所述纯化方法包括如下步骤： [0010]将含诃子提取物的上样液 上样于装有HP D400大孔树脂的层析柱中， 并进行吸附； [0011]吸附完成后， 用去离子水洗脱， 洗脱流速为2.5～4.5BV/h； 然后用60～80vol％乙 醇洗脱， 洗脱流速为5～7BV/ h， 收集乙醇洗脱液并浓 缩， 干燥， 得到诃子鞣质部位纯化产物。说　明　书 1/10 页 3 CN 113332320 B 3