(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110764887.1 (22)申请日 2021.07.07 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113248616 A (43)申请公布日 2021.08.13 (73)专利权人 北京艺妙神州医药 科技有限公司 地址 100195 北京市海淀区杏石口路80号B 区1号楼3层316号 (72)发明人 何霆　鲁薪安　齐菲菲　丁艳萍　 李洋　 (74)专利代理 机构 北京北翔 知识产权代理有限 公司 11285 代理人 张拥　张广育 (51)Int.Cl. C07K 16/30(2006.01)C07K 19/00(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 周奋进 (54)发明名称 靶向GPC3的嵌合抗原受体及其用途 (57)摘要 本发明提供了特异性识别GPC3靶点的抗体， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO:1、 6或12所示。 还提 供了靶向GPC3的嵌合抗原受体， 其包含如SEQ  ID  NO:1、 6或12所示的氨 基酸序列。 还提供了编码所 述嵌合抗原受体的核酸分子， 包含 所述核酸分子 的载体和细胞， 以及所述抗体、 嵌合抗原受体、 核 酸分子、 载体或细胞在制备治疗GPC3阳性疾病的 药物中的用途。 权利要求书2页 说明书23页 序列表37页 附图7页 CN 113248616 B 2022.04.12 CN 113248616 B 1.一种靶向GPC3的嵌合抗原受体， 其由单链抗体、 铰链区、 跨膜区、 共刺激信号域和CD3 ζ信号域组成； 所述CD3ζ信号域为改造后的CD3ζ信号域； 所述改造后的CD 3ζ信号域的氨基酸 序列如SEQ  ID NO:31所示； 所述单链抗体包 含： 1) 氨基酸序列如SEQ  ID NO:2所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ  ID NO:4所示的 轻链可变区； 或 2) 氨基酸序列如SEQ  ID NO:8所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ  ID NO:10所示 的轻链可变区。 2.权利要求1所述的嵌合抗原 受体， 其中， 所述单链抗体的重链可变区和轻链可变区由 富含甘氨酸和丝氨酸的柔 性接头肽链连接 。 3.权利要求2所述的嵌合抗原受体， 其中， 所述单链抗体的氨基酸序列如SEQ  ID NO:6 或12所示。 4.权利要求1所述的嵌合 抗原受体， 其中， 在所述单链抗体的N末端添加保护肽段。 5.权利要求 4所述的嵌合 抗原受体， 其中， 所述保护肽段富含8 ‑15个极性氨基酸。 6.权利要求5所述的嵌合抗原受体， 其中， 所述保护肽段的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 14、 15、 16、 17或18所示。 7.权利要求6所述的嵌合抗原 受体， 其中， 所述保护肽段通过柔性接头肽链与 所述单链 抗体的N末端相连。 8.权利要求7所述的嵌合抗原受体， 其中， 在N末端添加了保护肽段的单链抗体的氨基 酸序列如SEQ  ID NO:19或21所示。 9.权利要求1所述的嵌合抗原受体， 其中， 所述共刺激信号域为天然 的4‑1BB共刺激信 号域、 天然的CD28共刺激信号 域或改造后的4 ‑1BB共刺激信号 域； 其中， 所述天然的4 ‑1BB共刺激信号域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:23所示， 所述改造后 的4‑1BB共刺激信号 域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:25所示。 10.权利要求1所述的嵌合抗原受体， 其中， 所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ  ID  NO:35、 37、 39或41所示。 11.一种核酸分子， 其为编码权利要求1 ‑10中任一项所述的嵌合抗原受体的核苷酸序 列。 12.权利要求1 1所述的核酸分子， 其中， 编码所述单链抗体的核苷酸序列包 含： 1) 编码所述重链可变区的核苷酸序列， 其如SEQ  ID NO:3所示； 和编码所述轻链可变 区的核苷酸序列， 其如SEQ  ID NO:5所示； 或 2) 编码所述重链可变区的核苷酸序列， 其如SEQ  ID NO:9所示； 和编码所述轻链可变 区的核苷酸序列， 其如SEQ  ID NO:11所示。 13.权利要求11或12所述的核酸分子， 其中， 编码所述单链抗体的核苷酸序列如SEQ  ID  NO:7、 13、 20或2 2所示。 14.权利要求11所述的核酸分子， 其中， 编码所述嵌合抗原受体的核苷酸序列如SEQ  ID  NO:36、 38、 40或42所示。 15.一种载体， 其包 含权利要求1 1所述的核酸分子 。 16.权利要求15所述的载体， 其中， 所述载体是慢病毒载体或逆转录病毒载体。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113248616 B 217.权利要求16所述的载体， 其中， 所述载体是慢病毒载体。 18.一种细胞， 其包 含权利要求1 1所述的核酸分子或权利要求15所述的载体。 19.权利要求18所述的细胞， 其中， 所述细胞为自体或异体的T细胞、 自然杀伤细胞、 细 胞毒性T细胞、 肿瘤浸润T细胞或调节性T细胞。 20.权利要求19所述的细胞， 其中， 所述细胞为自体或异体的T细胞。 21.一种药物 组合物， 其包含权利要求1 ‑10中任一项所述的嵌合抗原受体、 权利要求11 所述的核酸分子、 权利要求15所述的载体或权利要求18所述的细胞， 以及可 药用载体。 22.权利要求1 ‑10中任一项所述的嵌合抗原受体、 权利要求11所述的核酸分子、 权利要 求15所述的载体、 权利要求18所述的细胞或权利要求21所述的药物组合物在制备治疗GPC3 阳性肿瘤的药物中的用途。 23.权利要求2 2所述的用途， 其中， 所述GPC 3阳性肿瘤为 肝癌。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113248616 B 3